鸡J亚群禽白血病病毒AH-J11株的全基因组感染性克隆构建

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2013.12.017

畜牧兽医学报 ›› 2013, Vol. 44 ›› Issue (12): 1976-1981.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.12.017

鸡J亚群禽白血病病毒AH-J11株的全基因组感染性克隆构建

王蓓¹，刘芳¹，王汉清¹，李宁¹，魏建忠¹，刘光清²，王桂军^1*

（1. 安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036；2. 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

收稿日期:2013-05-29 出版日期:2013-12-23 发布日期:2013-12-23
通讯作者: 王桂军（1969-），教授，E-mail: wangguijun@ahau.edu.cn
作者简介:王蓓(1988-)，女，山西万荣县人，硕士生，主要从事家禽传染病学研究，E-mail: wb0064@126.com
基金资助:
安徽省科技攻关战略性新兴产业项目(11010302119)；安徽省自然科学基金(11040606M90)；公益性农业科研专项(201003012；0080319); “863”计划(2011AA10A200)

Construction of Infectious Clone of Avian Leucosis Virus Subgroup J AH-J11 Strain

WANG Bei¹, LIU Fang¹, WANG Han-qing¹, LI Ning¹, WEI Jian-zhong¹, LIU Guang-qing², WANG Gui-jun^1*

(1.College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China; 2.Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China)

Received:2013-05-29 Online:2013-12-23 Published:2013-12-23

摘要/Abstract

摘要：

为探究鸡Ｊ亚群禽白血病病毒（ALV-J）的致病机理，采用PCR方法分4段分别扩增出J亚群禽白血病病毒安徽分离株AH-J11的前病毒cDNA，PCR产物经克隆鉴定，酶切后顺次连接，获得含有完整ALV-J AH-J11株前病毒cDNA的重组质粒，命名为pSK-AH-J11。将AH-J11株全基因序列克隆至pBluescript Ⅱ SK(+)载体中，得到重组质粒pBl-AH-J11，并将其转染鸡胚成纤维细胞（CEF）。通过间接免疫荧光试验，RT-PCR和Western blot检测，并经测序验证比对拯救前后病毒的gp85基因序列，结果均表明拯救出了1株重组Ｊ亚群禽白血病病毒(rALV-J)。本研究成功构建了鸡ALV-J的感染性克隆并救获了其重组病毒，为研究禽白血病的致病机理提供了良好的反向遗传操作技术平台。

Abstract:

In order to explore the pathogenesis of subgroup J avian leukosis virus(ALV-J), a full-length infectious clone of ALV-J (pSK-AH-J11) was constructed by combining of four fragments using PCR method from AH-J11 isolated from broiler in Anhui province, then the complete genome was cloned into pBluescript Ⅱ SK(+) vector. The recombinant plasmid pBl-AH-J11 was transfected into chicken embryo fibroblast (CEF) cells and the recombinant ALV-J was rescued. The rescued ALV-J (rALV-J) was identified by RT-PCR, Western blot, indirect immunofluorescence assay and sequence comparision of gp85 gene with AH-J11strain, respectively. The results showed that the recombinant rALV-J was rescued in CEF. This study provides a useful platform for investigation of the pathogenesis and molecular biology of ALV-J.

中图分类号:

S852.659.3

王蓓，刘芳，王汉清，李宁，魏建忠，刘光清，王桂军. 鸡J亚群禽白血病病毒AH-J11株的全基因组感染性克隆构建[J]. 畜牧兽医学报, 2013, 44(12): 1976-1981.

WANG Bei, LIU Fang, WANG Han-qing, LI Ning, WEI Jian-zhong, LIU Guang-qing, WANG Gui-jun. Construction of Infectious Clone of Avian Leucosis Virus Subgroup J AH-J11 Strain[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2013, 44(12): 1976-1981.

0
/ / 推荐

导出引用管理器 EndNote|Reference Manager|ProCite|BibTeX|RefWorks

链接本文: https://www.xmsyxb.com/CN/10.11843/j.issn.0366-6964.2013.12.017

https://www.xmsyxb.com/CN/Y2013/V44/I12/1976

参考文献

［1］PAYNE L N, S R BROWN, N BUMSTEAD, et al. A novel subgroup of exogenous avian leucosis virus in chickens［J］. J Gen Virol, 1991, 72(Pt 4): 801-807.

［2］王建新，崔治中，张纪元,等．J亚群禽自血病病毒与禽网状内皮增生症病毒共感染对肉鸡生长和免疫功能的抑制作用［J］．中国兽医学报，2003，23(3)：211-213.

［3］刘绍琼, 王波, 张振杰, 等. 817肉杂鸡肉瘤组织分离出A、J亚型禽白血病病毒［J］. 畜牧兽医学报，2011, 42(3): 396-401.

［4］CUI Z, DU Y, ZHANG Z, et al. Comparison of Chinese field strains of avian leukosis subgroup J viruses with prototype strain HPRS-103 and United States strains ［J］. Avian Dis, 2003, 47(4):1321-1330.

［5］XU B, DONG W, YU C, et al. Occurrence of avian leukosis virus subgroup J in commercial layer flocks in China ［J］. Avian Pathol, 2004, 33(1): 13-17.

［6］SUN S, CUI Z. Epidemiological and pathological studies of subgroup J avian leukosis virus infections in Chinese local "yellow" chickens ［J］. Avian Pathol, 2007, 36(3): 221-226.

［7］倪伟, 秦立廷, 孙洪磊, 等. 某海兰褐鸡场祖代、父母代及商品代鸡血管瘤型ALV-J的分离与鉴定［J］. 畜牧兽医学报, 2011, 42(9): 1341-1345.

［8］张振杰, 刘少琼, 王波, 等. 地方品种皖南黄肉种鸡ALV-J与REV的共感染及其分子变异分析［J］. 中国农业科学, 2011, 44(11):2379-2386.

［9］张贺楠, 齐岩, 史伟伟. 不同病变型J亚群禽白血病病毒LTR启动子序列分析及活性比较［J］. 病毒学报, 2010, 26(5): 402-406.

［10］张纪元，崔治中，丁家波，等.J亚群白血病病毒NXO101株感染性克隆化病毒的构建及其致病性［J］. 微生物学报，2005，45(3):437-440.

［11］张贺楠，赖汉漳，梁雁萍，等.血管瘤病变型J亚群禽白血病CHN株感染性克隆的构建［C］.// 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集.哈尔滨，2008.

［12］王超，缪华先，谢宝婵，等.J亚型禽白血病病毒的拯救与鉴定［J］. 中国预防兽医学报，2011，35(11):837-840.

［13］林艳，夏静，邹年莉, 等. 1株髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒感染性克隆的构建与病毒拯救［J］. 畜牧兽医学报，2013，44(5): 754-759.

［14］纪晓琳，王琦，高玉龙, 等. J亚群禽白血病病毒分离株HLJ09SH01株感染性克隆的构建及其致病性研究［J］. 中国预防兽医学报，2013, 35(1): 15-18.

［15］王琦，王永强，康忠惠，等.蛋鸡J亚群禽白血病病毒分离株SD1009株感染性克隆的构建与病毒拯救［J］. 中国兽医科学，2011，41(11):1111-1116.

［16］萨姆布鲁克 J, 拉塞尔D W. 分子克隆实验指南［M］. 黄培堂，王嘉玺，朱厚础，等译.3版.北京：科学出版社，2002.

［17］高玉龙，贠炳岭，秦立廷, 等. 蛋鸡J 亚群禽白血病病毒3′非编码区序列特征分析［J］. 畜牧兽医学报，2012, 43(11):1841-1846.

[1]	郭妍妍, 梁灿新, 李锦群, 董欣怡, 廖明, 曹伟胜. 广东地方品种鸡ALV-K分子流行病学及gag基因12 bp缺失对病毒体外复制能力影响的研究[J]. 畜牧兽医学报, 2022, 53(11): 3956-3966.
[2]	王萌, 张森豪, 张柳, 李佳璇, 王晓娜, 崔文, 姜艳平, 周晗, 王丽, 乔薪瑗, 李一经, 唐丽杰. 1株E亚群禽白血病病毒的分离鉴定及遗传进化分析[J]. 畜牧兽医学报, 2022, 53(9): 3107-3120.
[3]	白少川, 张乐超, 葛琳涵, 郭艳丽, 王德贺, 李兰会. 内源性逆转录病毒的转录表达与宿主功能关系的研究进展[J]. 畜牧兽医学报, 2021, 52(8): 2107-2114.
[4]	陈胜, 廖志宏, 谢姿, 陈峰, 谢青梅, 舒薇. GADD45β蛋白抑制ALV-J在DF-1细胞中的复制[J]. 畜牧兽医学报, 2021, 52(6): 1662-1669.
[5]	张彦红, 李岩, 杨艳, 张哲, 吕文华, 钱天皓, 蒙亚琦, 盛金良. 新疆部分地区梅迪维斯纳病毒感染的血清学调查[J]. 畜牧兽医学报, 2020, 51(8): 2022-2026.
[6]	张会永, 吴井生, 李国辉, 俞燕, 杨剑波, 苏一军, 殷建玫, 韩威. 禽白血病病毒在惠阳胡须鸡和汶上芦花鸡的垂直传播特性分析[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(7): 1475-1481.
[7]	赵娟, 徐斯日古楞, 李慧萍, 刘淑英. 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白引起绵羊绒毛膜滋养层细胞的恶性转化[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(5): 1089-1095.
[8]	赵子君, 饶明章, 陈建, 张杰, 袁丽霞, 廖明, 曹伟胜. K亚群禽白血病病毒5'LTR序列及启动活性分析[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(4): 754-760.
[9]	王晓燕, 刘文超, 付礼胜, 高雪丽, 刘超男, 吕晓萍, 郑世民. 禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF雏鸡血液淋巴细胞增殖功能及其细胞周期相关因子变化[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(1): 157-163.
[10]	李久庆, 刘强, 郭雷, 许传田, 崔宁, 李冰, 崔治中. 一株新亚群禽白血病病毒全基因组序列分析[J]. 畜牧兽医学报, 2017, 48(9): 1718-1723.
[11]	王麒, 王晗, 张秀玲, 刘春杨, 张乐超, 李兰会, 李祥龙. 鸡内源白血病病毒ev21与慢羽非连锁分析和LTR区启动子活性分析[J]. 畜牧兽医学报, 2017, 48(5): 930-937.
[12]	饶明章，袁丽霞，赵子君，张杰，李锦群，廖明，曹伟胜. 黄羽祖代公鸡精液作为禽白血病净化检测材料的应用研究[J]. 畜牧兽医学报, 2017, 48(1): 124-131.
[13]	孙晓林，杜方原，刘淑英. 外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白激活MAPK信号通路的分析[J]. 畜牧兽医学报, 2016, 47(8): 1658-1666.
[14]	周芳，岳华，张斌，李凡，陈曦，汤承. 牦牛轮状病毒VP6基因序列分析及RT-PCR检测方法的建立与应用[J]. 畜牧兽医学报, 2016, 47(7): 1465-1473.
[15]	李凯，高立，祁小乐，高宏雷，高玉龙，王永强，王笑梅. 禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF鸡免疫器官和疫苗免疫效果的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2016, 47(2): 340-345.

鸡J亚群禽白血病病毒AH-J11株的全基因组感染性克隆构建

Construction of Infectious Clone of Avian Leucosis Virus Subgroup J AH-J11 Strain

RichHTML

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价